人
<2EU/mL
棕色液体
ActCel T细胞激活试剂由纳米磁珠与抗人CD3抗体和抗人CD28抗体偶联合成,可温和高效地激活T细胞。
实验步骤:
1.1 按照1:200滴度进行实验,具体添加量如下表所示:
培养板 | 最大培养体积 | 总T细胞个数 | 每孔加入T细胞激活试剂的体积 |
96孔 | 0.2mL | 0.3×10⁶ | 1 μL |
48孔 | 1mL | 1×10⁶ | 5 μL |
24孔 | 2mL | 2×10⁶ | 10 μL |
12孔 | 4mL | 4×10⁶ | 20 μL |
6孔 | 5mL | 5×10⁶ | 25 μL |
1.2 以1×10⁶个T细胞为例:在1×10⁶个T细胞中加入995μL X-VIVOTM 15培养基和5μL T细胞激活试剂,其中包含200 IU/mL IL-2,在37℃,5% CO₂条件下培养2天。
1.3 培养2~3天后,300g离心10min,去除上清,加入2mL新鲜的完全培养基,以去除T细胞激活试剂并在37℃,5% CO₂条件下培养。
1.4 每2天将细胞悬液吹打混匀,加入2倍体积的新鲜完全培养基(原体积:补液体积=1:2),并进行计数计算扩增倍数,在37℃,5% CO2培养箱中培养。如D4天补液,原体积为2ml,应补液4ml,最终总体积为6ml。
注意事项:
1. T细胞激活试剂与细胞孵育时需要彻底混匀,以提高激活效率。
2. T细胞激活试剂滴度可以按照1:100~300进行调整。
3. 离心去除T细胞激活试剂的时间可根据客户需求进行优化。